日常的生活當(dāng)中，身體的一些結(jié)構(gòu)成分以及分子量成分，是我們不太了解的，因?yàn)椴涣私馑圆艜?huì)讓人不認(rèn)識(shí)，產(chǎn)生一些分歧，給人們的身體也會(huì)造成影響，其實(shí)分離純化蛋白質(zhì)的方法，可以通過了解分離方法以及具體的組合成分進(jìn)行相應(yīng)的判斷，只有了解到這方面的問題，才能知道究竟是如何組成的。
分離方法
透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開的方法。
超濾法
應(yīng)用正壓或離心力使蛋白質(zhì)溶液透過有一定截留分子量的超濾膜，達(dá)到濃縮蛋白質(zhì)溶液的目的。
丙酮、乙醇等有機(jī)溶劑沉淀法，可破壞蛋白質(zhì)的水化層，在0~4℃低溫下，使蛋白質(zhì)沉淀。環(huán)境溫度高等不良因素影響下，有機(jī)溶劑可促使蛋白質(zhì)變性。
鹽析(salt precipitation)是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液，使蛋白質(zhì)表面電荷被中和以及水化膜被破壞，導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀。
免疫沉淀法:利用特異抗體識(shí)別相應(yīng)的抗原蛋白，并形成抗原抗體復(fù)合物的性質(zhì)，可從蛋白質(zhì)混合溶液中分離獲得抗原蛋白。
電泳法:蛋白質(zhì)在高于或低于其pI的溶液中為帶電的顆粒，在電場(chǎng)中能向正極或負(fù)極移動(dòng)。這種通過蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中泳動(dòng)而達(dá)到分離各種蛋白質(zhì)的技術(shù), 稱為電泳(elctrophoresis) 。幾種重要的蛋白質(zhì)電泳:
電泳操作
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，常用于蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定。
等電聚焦電泳，通過蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的差異而分離蛋白質(zhì)的電泳方法。
雙向凝膠電泳是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的重要技術(shù)。
層析(chromatography)或色譜法:待分離蛋白質(zhì)溶液(流動(dòng)相)經(jīng)過一個(gè)固態(tài)物質(zhì)(固定相)時(shí)，根據(jù)待分離蛋白質(zhì)的顆粒大小、電荷多少及親和力等，使蛋白質(zhì)組分在兩相中反復(fù)分配，并以不同速度流經(jīng)固定相而分離蛋白質(zhì)。凝膠過濾(分子篩，gel filtration;排阻色譜):利用各蛋白質(zhì)分子大小不同分離。
離子交換:蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同。
陽(yáng)離子交換劑:CM-纖維素
陰離子交換劑:DEAE-纖維素
親和層析:抗原-抗體，配體-受體，金屬離子，生物素等
高效液相(HPLC):反相HPLC，離子HPLC，凝膠過濾HPLC
超速離心法(ultracentrifugation):根據(jù)蛋白質(zhì)的分子量與形狀分離。
