HPV學(xué)名是人乳頭瘤病毒,患者病情嚴(yán)重的話會(huì)惡變?yōu)閷m頸癌??茖W(xué)家已證實(shí),此病毒是一種基因病毒,且是一種只有人類才會(huì)生的病。人類在感染該病毒后,會(huì)有一個(gè)長(zhǎng)時(shí)間的潛伏期,一旦病毒的時(shí)機(jī)到了就會(huì)致病。而HPV的檢測(cè)在很大程度上提高了檢出率,而檢測(cè)方法是基于細(xì)胞學(xué)檢查,本文將簡(jiǎn)要介紹這些方法。
1、現(xiàn)有的HPV實(shí)驗(yàn)室主要檢測(cè)手段:
① 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR,
Polymerase Chain Reaction):擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA片斷的方法。該法有較高的敏感度,可進(jìn)行HPV分型,缺點(diǎn)是對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求較高,容易發(fā)生樣本間的交叉污染,從而導(dǎo)致假陽(yáng)性率高。
② 核酸雜交檢測(cè)
有較好的特異性和敏感度,還可以進(jìn)行HPV DNA的分型,各種核酸雜交檢測(cè)方法有一定的優(yōu)缺點(diǎn)。
A核酸印跡原位雜交
適用于HPV分型和HPV DNA分子量鑒定,雖然靈敏度高,但因操作復(fù)雜,需要新鮮組織標(biāo)本,不便在臨床上大規(guī)模使用。
B斑點(diǎn)印跡
其敏感度和特異性均低于核酸印跡原位雜交法,雖然經(jīng)濟(jì)實(shí)用,但實(shí)驗(yàn)過(guò)程存在有放射性污染,是環(huán)保所不能輕視的問(wèn)題。
C原位雜交(in situ hybridization,一種核酸雜交技術(shù),可用來(lái)測(cè)定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位,檢測(cè)重組體DNA) 通過(guò)非放射性探針對(duì)石蠟組織進(jìn)行檢測(cè),能作定位檢測(cè),假陽(yáng)性率低,但靈敏度不高,大大降低了臨床使用價(jià)值。
D雜交捕獲法(Hybrid Capture)
雜交捕獲試驗(yàn)是利用化學(xué)發(fā)光對(duì)抗體捕獲的信號(hào)加以放大。首先使DNA雙鏈釋放并分解成為可以雜交的核苷酸單鏈,DNA單鏈與RNA組合探針結(jié)合為RNA-DNA雜合體,特異性抗體將RNA-DNA雜合體捕獲,偶聯(lián)有堿性磷酸酶的第二抗體與RNA-DNA雜合體結(jié)合,堿性磷酸酶使酶底物發(fā)光,根據(jù)光的強(qiáng)弱可確定堿性磷酸酶的含量,從而確定RNA-DNA雜合體的含量。能檢測(cè)13種高危型HPV,包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。
2、最新推出的HPV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)
高靈敏度高危型HPV分型多色熒光實(shí)時(shí)PCR試劑:為歐洲著名分子生物學(xué)研究機(jī)構(gòu)專門針對(duì)宮頸癌篩查而全新設(shè)計(jì)的高危型HPV分型多色熒光實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)試劑,可同時(shí)檢測(cè)高危型中最主要的16、18、31/33、35/45型。